2020年4月27日
由艾伦·哈林顿重新介绍
重点形成试验-病毒滴度定量
2021年6月8日
我们观察到人们对“聚焦形成分析-病毒滴度定量”应用程序笔记的兴趣稳步增加,该笔记由SYNENTEC并在一年前被BPES共享!
由于这个话题很受欢迎,并且由于当前的事件而变得非常重要,我们认为一个更新的版本是有必要的。
类似于SYNENTEC的病毒空斑分析(其好处我已经在前一篇文章) -焦点形成试验(FFA)是密切相关的,除了不是检测病毒诱导细胞裂解后的空斑形成,该试验检测被感染的宿主细胞和感染性病毒颗粒在空斑形成之前。
用感兴趣的病毒连续稀释感染不同的单层细胞样本。经过一夜的孵育后,宿主细胞形成感染细胞簇,通过特异性的抗病毒抗原的辣根过氧化物酶(HRP)偶联抗体的免疫染色可以看到这些细胞簇。
辣根过氧化物(HRP)可与3-3 '二氨基联苯胺四盐酸盐(DAB)氧化,生成棕色/黑色不溶沉淀物(也称为“黑斑”)。这些病灶在NyONE或Cellavista成像仪上用亮场照明显示,内置的yte图像分析软件对感染病灶的数量进行量化,从而提供病毒滴度定量。
从软件读出(要了解更多信息,请参阅ShortNote男朋友黑点)
- #的焦点
- 意思是焦点的大小
- 完全融合
- %疫区覆盖面积
如要讨论此分析,请与我联系(艾伦·哈林顿)查询更多资料。
本文由:
艾伦·哈林顿
技术销售专家
E。eharrington@bioprocess-eng.co.uk